珍龙醒脑胶囊对高脂血症的改善作用

郜靓^1,2,3张玉霞^1,2,3吕博文杨红霞^1,2杜玉枝^1,2*

(1.中国科学院西北高原生物研究所青海省藏药药理学与安全性评价研究重点实验室，西宁810008；2.中国科学院藏药重点实验室，西宁810008；3.中国科学院大学，北京10004）

摘要：目的：研究珍龙醒脑胶囊对高脂血症的改善作用，为后期开发利用提供基础数据。方法：健康大鼠70只，随机分为空白组、模型组、阳性对照组（血脂康胶囊、辛伐他汀片）及珍龙醒脑胶囊高、中、低剂量组，10只/组。以高脂饲料诱导4周，形成高血脂模型后给药。给药4周后，试剂盒检测超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、总胆固醇（T-CHO/TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）含量。并取肝脏进行切片分析。结果：给药4周后，与模型组比较，给药组大鼠血清TG、TC、LDL-C、MDA及SOD抑制率显著降低（P＜0.05或P＜0.01），血清HDL-C升高，并且给药组大鼠的肝脏空泡样病变较模型组数量减少且面积减小。结论:珍龙醒脑胶囊可改善大鼠高脂血症。

关键词：高脂血症；珍龙醒脑胶囊；动物实验中图分类号:R972 .6文献标识码:A

文章编号:1005-9393(2022)02-0033-05

作者简介:郜靓(1994-)，女，中国科学院西北高原生物研究所在读博士研究生，主要研究领域：藏药药理学。

*通讯作者:杜玉枝(1963-)，女，研究员，硕士生导师，主要研究领域：藏药药理及新产品开发。E-mail：yzdu@nwipb.cas.cn。

高脂血症，又称血脂异常或者脂代谢紊乱^[1]，是引起心脑血管疾病的重要风险因素之一。当血浆中总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白等一种或多种成分增高或者降低时可导致体内脂质代谢紊乱，引发血脂异常，继而造成血液浓稠，逐渐沉积在血管壁上，形成“动脉粥样硬化斑块”，使血管窄化甚至堵塞，血流变慢，严重时可出现血流中断现象，引起冠心病、脑梗死、肾衰竭、肢体坏死、溃烂等^[2]症状。

《美国心脏病学会杂志》（JACC）研究表明^[3-4]，高血脂人群，即使血脂得到控制后心肌梗塞、中风等心血管疾病的发病率依然远高于其他人。据《2015年中国居民营养与慢性病状况报告》显示^[5]，至2012年中国成人血脂异常总体患病率已高达40.4%，因此死亡的人数占居民疾病死亡构成的40％以上。WHO最新资料显示^[6]，全球超过50％的冠心病发生与胆固醇水平升高有关。我国冠心病死亡率不断增加，胆固醇水平升高的影响占77％，明显超过糖尿病和吸烟。同时高脂血症也是促进高血压、糖耐量异常、糖尿病的重要因素。目前，我国高血压患者已达2.45亿，发病率达到27.9%，其中高血压伴有高脂血症患者达到50%以上，高血脂的治愈率仅有10.7%。目前治疗高脂血症的主流药物还是他汀类药物，该类药物可明显改善高脂血症，但其副作用较多^[7]，会降低免疫力、抑制维生素K2、降低辅酶Q10、增加心力衰竭风险、增加认知功能障碍风险、增加抑郁症风险^[8]。

藏医《四部医典》记载，珍龙醒脑胶囊是治疗“白脉病”的良方^[9]，是治疗脑血管疾病的经典藏药处方。据研究发现^[10]，珍龙醒脑胶囊可以溶解血栓、消除动脉粥样硬化斑块、解除血管平滑肌痉挛、扩张血管、改善微循环、增加血流速度、降低血液黏度、扩张微小动静脉、降低脑血管通透性、减少自由基损伤、改善脑梗死的预后，尤其在减少脑梗死后遗症、促进语言肢体机能恢复等方面疗效显著。故为进行优势藏药处方二次开发利用，本文对珍龙醒脑胶囊的降血脂作用进行研究。

1材料和方法

1.1实验动物

8~10周龄的SPF级SD大鼠70只，体质量200±20g，购自甘肃中医药大学科研实验中心，实验动物生产许可证号：SCXK（甘）2015-0002。动物实验操作过程依照中国科学院西北高原生物研究所动物实验伦理委员会的要求执行。

1.2试剂和主要仪器

HDL-C、LDL-C、TG、T-CHO、SOD、MDA检测试剂盒（南京建成生物工程研究所）;珍龙醒脑胶囊（青海金诃藏药股份有限公司，批号：01200701）；血脂康胶囊（北京北大维信生物科技有限公司，生产批号：20201105）；辛伐他汀片（山东鲁抗医药股份有限公司，生产批号：191203）；水合氯醛（天津市凯通化学试剂有限公司）；高脂高胆固醇普通饲料（江苏美迪森生物医药有限公司）；Co60辐照实验鼠维持饲料（江苏协同医药生物工程）；数显恒温水浴锅（邦西科技（上海）有限公司）；多功能酶标仪（美国PerkinElmer公司）；电子分析天平（岛津菲律宾制造有限公司）；台式高速冷冻离心机（德国Sigma公司）；超低温冰箱（中科美菱低温科技公司）。

1.3实验方法

1.3.1造模及分组

SPF级♂大鼠70只，按体重随机分为空白组、模型组、阳性对照组（血脂康胶囊、辛伐他汀片）及珍龙醒脑胶囊高、中、低剂量组，10只/组。以高脂饲料诱导4周，检测相关指标判断高血脂模型是否成立，模型成立后，空白组及模型组以纯水灌胃（0.1mL/10g），其余各组分别灌服血脂康胶囊（105.76mg/kg）、辛伐他汀片（1.76mg/kg）和高剂量珍龙醒脑胶囊（211.6mg/kg）、中剂量珍龙醒脑胶囊（105.8mg/kg）、低剂量珍龙醒脑胶囊（53mg/kg）。给药剂量以珍龙醒脑胶囊临床剂量为中剂量，其1/2为低剂量、2倍为高剂量。

1.3.2体质量观察

每周称大鼠体质量并且根据体质量变化调整给药量，选择造模前后及给药4周后三个时间点对实验大鼠的体质量变化比较。

1.3.3血液指标检测

分别在造模前、造模后、给药4周后进行眼球采血，采用试剂盒对大鼠血清超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、总胆固醇（T-CHO）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）含量进行检测。

1.3.4脏器系数

给药4周后，10%水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠，取大鼠肝、肾、脾称重，并计算脏器系数。

1.3.5肝脏切片

给药4周后，10%水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠，取大鼠肝脏进行病理切片分析。

1.4数据统计

采用SPSS20.0统计软件处理数据，结果以`x±s表示，组间总体比较采用单因素方差分析、非参数检验，组间两两比较采用LSD-t检验，检验水准P＜0.05。采用K-viewer软件对肝脏病理切片进行观察分析。

2结果

2.1体质量变化

各组大鼠体质量经时变化如图1所示，造模前各组大鼠体质量基础值基本相同；造模后，与空白组相比，其余各组体重明显升高，其中以模型组体重增长幅度最大；给药4周后，与模型组相比，给药组的大鼠体质量增长幅度降低。

图1各组大鼠体质量经时变化

2.2血液指标变化

与模型组比较，给药4周后（表1），给药组TG、T-CHO、MDA均显著降低（P＜0.01）；LDL-C显著降低（P＜0.05或P＜0.01）；HDL-C显著升高（P＜0.01）；除高剂量组外，SOD活力显著升高（P＜0.05），高剂量组SOD活力降低。

表1给药干预后各组大鼠血液指标水平（`x±s，n=10）

注：与空白组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01；与模型组比较，^#P＜0.05，^##P＜0.01。

2.3脏器系数变化

如表2所示，以肝脏、肾脏、脾脏的质量除以动物体质量计算其所占百分比为脏器系数，与空白组比较，模型组肝脏的脏器系数明显升高，肾脏的脏器系数降低，脾脏脏器系数升高，但无显著性差异。与模型组比较，给药组肝脏及脾脏脏器系数降低；高剂量组肾脏脏器系数升高，其余各组降低，但无显著性差异。

表2给药干预后各组大鼠脏器系数变化

注：与空白组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01；与模型组比较，^#P＜0.05，^##P＜0.01。

2.4肝脏病理切片

给药4周后，各组大鼠病理切片（图2）结果显示，与空白组比较，高脂饲料诱导4周后模型组大鼠肝脏有明显空泡样病变，说明高血脂大鼠模型复制成功；与模型组相比，给药后各组大鼠肝脏空泡样病变大小及数量得到明显的改善，其中以珍龙醒脑胶囊中剂量组的空泡样病变改善最为明显。

注：A—空白组；B—模型组；C—血脂康组；D—辛伐他汀组；E—低剂量组；F—中剂量组；G—高剂量组。

图2给药干预后各组大鼠肝脏病理切片

3讨论

高脂血症临床症状并不明显，主要临床表现为头晕、乏力、困倦感、心悸等，与饮食不规律、喝酒、抽烟等习惯有密切联系^[11]。珍龙醒脑胶囊是以藏药二十五味珍珠母散为基础研制而成，组方包括珍珠、紫檀香、麝香、西红花、余甘子、冬葵果、诃子、短穗兔耳草、塞北紫堇、人工牛黄、木香等^[12],临床常用以开窍醒神、清热通络，用于痰瘀阻络所致的中风、语言蹇涩、半身不遂、口眼歪斜。当血浆内总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白B中的一种或多种高于正常水平，并伴有高密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白AI降低^[13-14]，则可判断为高脂血症。西医对高脂血症的临床治疗主要从强化降脂方面入手^[15]。在临床上，高脂血症属于多发病，会引起动脉粥样硬化，导致血管弹性降低、脆性增加，易形成血栓，并导致冠心病等心脑血管疾病^[16]。故本研究旨在探索珍龙醒脑胶囊治疗高脂血症的功效，通过对藏药优势品种珍龙醒脑胶囊临床适应证的二次开发利用，使冠心病、脑中风等心血管疾病在初期通过调控血脂平衡而得到有效的避免和控制。在本研究中，利用高脂饲料诱导大鼠4周后，大鼠血清总胆固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白胆固醇含量显著升高，且高密度脂蛋白胆固醇含量降低，说明高血脂模型复制成功。给药4周后，大鼠血清中总胆固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白胆固醇含量显著降低，且高密度脂蛋白胆固醇含量显著升高，证实了珍龙醒脑胶囊可调节机体的血脂平衡，与已有研究相符。

高脂血症患者体内通常氧化应激水平过高^[17]，血清氧化呈失衡状态，自由基与脂质发生过氧化后以丙二醛的形式存在于机体内，可间接反映机体高脂血症的程度；超氧化歧化酶（SOD）是人体抗氧化最重要的机制之一^[18]，可调节血脂，防止动脉粥样硬化，降低血脂及胆固醇。有研究表明，降血脂药物可改善高脂血症血脂水平，降低肝脏占比^[19]，减少脂肪堆积；同时提高SOD活性，减少脂质过氧化反应终产物MDA含量，使机体抗氧化机制提升，分解清除体内过多的自由基，进而抑制活性氧与不饱和脂肪酸反应，减少氧化脂质在血管中的堆积^[20]。本研究实验与其结论相符，给药4周后，大鼠血清中丙二醛含量及超氧化物歧化酶活力显著降低，并且肝脏的脏器系数降低，说明珍龙醒脑胶囊具有调节高血脂大鼠体内氧化应激水平、平衡其体内过脂质化的作用。

综上所述，珍龙醒脑胶囊可以通过调节机体血脂平衡、氧化应激水平降低高血脂大鼠的血脂水平，显著改善大鼠高脂血症状。

参考文献:

[1]诸骏仁,高润霖,赵水平,等.中国成人血脂异常防治指南(2016年修订版)[J].中华心血管病杂志,2016(10):833-853.

[2]NELSON R H. Hyperlipidemia as a risk factor forcardiovascular disease[J].Primary Care:Clinics in OfficePractice,2013,40(1):195-211.

[3]DOMANSKI M J,TIAN X, WU C O, et al. Time course ofLDL cholesterol exposure and cardiovascular disease eventrisk[J].Journal of the American College of Cardiology,2020,76(13):1507-1516.

[4]Having high cholesterol levels early in life leads to heartproblems by middle age[Z/OL]. Retrieved September 25,2020. https://medicalxpress.com/news/2020-09-highcholesterol-early-life-heart.html.

[5]中华医学会.血脂异常基层诊疗指南(2019年)[J].中华全科医师杂志,2019,18(5):406-416.

[6]陈源源,王增武,李建军,等.高血压患者血压血脂综合管理中国专家共识[J].中华高血压杂志,2019,27(7):605-614.

[7]张向宇,吴明聪,孟祥祎,等.阿托伐他汀钙微球对高脂血症模型大鼠降脂作用研究[J].佳木斯大学学报(自然科学版),2020,38(6):77-82.

[8]李玲.他汀类降血脂药物的临床治疗研究进展[J].内蒙古医学杂志,2021,53(5):558-559,563.

[9]多杰,付加雷.珍龙醒脑胶囊治疗中风后遗症临床观察[J].中国中医药信息杂志,2009(10):73.

[10]谷朝霞.藏药珍龙醒脑胶囊联合醒脑静、依达拉奉治疗重症急性脑梗死的临床疗效[J].中国民族医药杂志,2021,27(3):20-22.

[11]马俊萍,张娟.高脂血症的中西医结合治疗进展[J].内蒙古中医药,2021,40(2):167-168.

[12]谷朝霞.藏药珍龙醒脑胶囊联合醒脑静、依达拉奉治疗重症急性脑梗死的临床疗效[J].中国民族医药杂志,2021,27(3):20-22.

[13]喻鹏,李炜弘,李晗,等.从“辨体-辨病”角度探讨高脂血症的研究现状及“治未病”思想的应用[J].世界科学技术:中医药现代化,2021,23(1):154-158.

[14]龚文涵.藏药血清丸联合中药降脂散治疗高脂血症的临床疗效[J].中国民族医药杂志,2021,27(2):3.

[15]张健俊,刘文洲,欧莉.红杏丸治疗高脂血症临床研究及其对TNF-ɑ、IL-6、ET-1的影响[J].现代中医药,2019,46(2):96-100.

[16]张帆.不同他汀类药物治疗老年动脉粥样硬化性急性脑梗塞合并高血脂患者的疗效分析[J].中国冶金工业医学杂志,2022,39(1):68-69.

[17]武桂荣,Maureen Jepkorir Cheserek,施用晖,等.不同类型血脂异常患者血清脂质和蛋白氧化产物比较[J].卫生研究,2014,43(4):529-534.

[18]张志宏,孟庆虹,高扬,等.熟化发芽糙米粉对高脂血症大鼠的作用研究[J].食品研究与开发,2021(5):46-51.

[19]胡秀文.降脂灵片联合辛伐他汀对脂肪肝合并高脂血症患者血脂及肝功能指标的影响[J].中医临床研究,2015,7(14):78-79.

[20]高伟,张会鲜,孙建云,等.珍龙醒脑胶囊对小鼠脑缺氧及脑缺血再灌注损伤的保护作用[J].中国老年学杂志,2012,32(22):4958-4960.

（文章内所有图片受版权保护 违者必究）